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产品名称:BD细胞凋亡试剂盒AnnexinV-FITC/PI双染

产品型号:556547

产品报价:16

产品特点:BD细胞凋亡试剂盒AnnexinV-FITC/PI双染
规格:100T
英文名:
AnnexinV-FITC/PI
库存状态:现货

556547BD细胞凋亡试剂盒AnnexinV-FITC/PI双染的详细资料:

BD细胞凋亡试剂盒AnnexinV-FITC/PI双染BD细胞凋亡试剂盒AnnexinV-FITC/PI双染

简单介绍:

 在正常细胞中,***脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡zui早期,膜***脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧,这一变化早于细胞皱缩、染色质浓缩、DN**断化和细胞膜的通透性增加等凋亡现象。AnnexinV是一种***脂结合蛋白,与***脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的***脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此AnnexinV被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。***化丙***(Propidium Iodide,PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和死细胞由于细胞膜通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红。因此将Annexin V与PI匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来。

操作步骤:

贴壁细胞需用0.25%的胰酶消化。注意过度消化可损伤细胞。在消化时可加2%的BSA可防止消化过度。如果用含EDTA的胰酶消化时,注意必须彻底清除EDTA:在标记前用1×PBS或1×bindingbuffer洗涤,清除EDTA,以免残余的EDTA与Ca2+螯合,影响Annexin V的结合。
(1)用去离子水将10×Binding Buffer稀释成1×Binding Buffer;
(2)细胞收集。悬浮细胞收集:离心5分钟;贴壁细胞:用不含EDTA的胰酶消化收集后(注:胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞膜上***脂酰丝氨酸与Annexin V-FITC的结合),于室温2000rpm离心5~10分钟,收集细胞;
(3)细胞洗涤:用预冷1×PBS(4℃)重悬细胞一次,2000rpm离心5~10分钟,洗涤细胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 悬浮细胞;
(5)Annexin V-FITC标记:加入5μL的Annexin V-FITC混匀后,避光,室温孵育15分钟;
(6)PI标记:上机前5分钟再加入5μL的PI染色。
(7)上机前,补加200μL的1×Binding Buffer。

组成成分:

Product code Description
556547         Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I
Components:
556547a      Annexin V Binding Buffer, 10X conc (51-66121E
556547b      Annexin V-FITC (51-65874X)
556547c      Propidium Iodide Staining Solution(51-66211E)

 

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